輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒

試劑一：粉劑 1×1瓶，粉劑 2×1瓶，4℃保存；臨用前用少量蒸餾水將粉劑 1和粉劑 2溶解 后倒入容量瓶中，用蒸餾水定容至 100mL，形成 NAD和 NADH提取液（注：試 劑瓶中的粉劑要沖洗干凈），4℃保存 3個(gè)月； 試劑二：粉劑 1×1瓶，粉劑 2×1瓶，粉劑 3×1瓶，4℃保存；臨用前用少量蒸餾水將粉劑 1、粉劑 2和粉劑 3溶解后倒入容量瓶中，用蒸餾水定容至 1000mL，形成流動(dòng)相緩 沖液基質(zhì)（注：試劑瓶中的粉劑要沖洗干凈）, 4℃保存 3個(gè)月。 試劑三：NAD標(biāo)準(zhǔn)品 5mg×1支，-20℃保存。加入 1mL試劑一，配成 5mg/mL溶液，現(xiàn)配 現(xiàn)用，用不完的試劑-20℃保存。 試劑四：NADH標(biāo)準(zhǔn)品 5 mg×1支，-20℃保存。加入 1mL試劑一，配成 5mg/mL溶液，現(xiàn) 配現(xiàn)用，用不完的試劑-20℃保存。

電子名片

工作原理：
NAD和 NADH在 254 nm下有吸收峰，利用高效液相色譜法在相應(yīng)波長(zhǎng)下測(cè)定其含量。
測(cè)定意義：
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD是糖酵解和 TCA循環(huán)
的主要?dú)涫荏w，生成的 NADH經(jīng)呼吸電子鏈傳遞把電子交給氧，在合成 ATP的同時(shí)，形成
大量的 ROS，同時(shí) NADH再生為 NAD。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕
大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和
TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的 NAD(H)及 NADH/NAD比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧
化狀態(tài)，NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和 TCA循環(huán)。另外，NAD降解產(chǎn)物具有非
常重要的調(diào)控作用。
標(biāo)本處理：
稱(chēng)取約 0.1g組織，加入 1mL試劑一，提取 NAD和 NADH，20000 g，4℃
離心 30 min，取上清液用 0.22μm水系針頭式過(guò)濾器過(guò)濾后待測(cè)。
細(xì)胞處理：收集于 60 mL細(xì)胞，離心菌體經(jīng)高壓冷凍干燥 12 h后，加入 2 mL試劑一。
超聲破壁細(xì)胞(950 W，30%，15 min，工作 1 s，間隔 2 s)，再經(jīng) 10000 g 4℃離心 40min，上
清用 0.22μm水系微孔濾膜過(guò)濾后直接上柱檢測(cè)。
訂購(gòu)流程：
    1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
    2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
    3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢(xún)客服。
    4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。
    5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專(zhuān)人取樣（限省內(nèi)客戶(hù)）。
    6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。
    7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā)損壞產(chǎn)品
    8、如因單位財(cái)務(wù)制度原因，可申請(qǐng)先發(fā)貨，報(bào)賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好
          客戶(hù)）。
注意事項(xiàng)：
影響顯色反應(yīng)的主要因素有哪些？
影響顯色反應(yīng)的主要因素有顯色劑的用量、溶液的酸度、顯色時(shí)間以及干擾離子等。
為了使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，如何選擇最適宜的測(cè)量條件？
一般從以下幾個(gè)方面來(lái)考慮：
①選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)量波長(zhǎng)。一般根據(jù)待測(cè)組分的吸收光譜選擇最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)量波長(zhǎng)。如果干擾組分在最大吸收波長(zhǎng)也有吸收,則應(yīng)根據(jù)：吸收大，干擾小”的原則來(lái)選擇測(cè)量波長(zhǎng)
②調(diào)價(jià)溶液的濃度，或選用不同厚度的吸收池，控制被測(cè)是呀的吸光度在0.2-0.8范圍內(nèi)。
③選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤骸?br />在分析復(fù)雜樣品時(shí)，如何消除干擾？
消除干擾方法主要有：
1、加入眼筆記，如加入配位掩蔽劑，使其與干擾離子生成測(cè)定波長(zhǎng)物吸收的配合物，如加入氧化還原掩蔽劑，改變干擾離子的價(jià)態(tài)。
2、選擇適宜的顯色條件，如控制溶液的酸度等，使干擾離子與顯色劑不發(fā)生反應(yīng)。3、采用雙波長(zhǎng)或其他選擇性的方法；
4、分離干擾離子。
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原創(chuàng)作者：青島捷世康生物科技有限公司

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